Der Septin9-Test Epi proColon

Der Septin9-Test Epi proColon ist ein blutbasierter Test, der als erster Schritt der Darmkrebs-Früherkennung durchgeführt werden kann. Bei einem positiven Testergebnis wird zur Abklärung der Diagnose eine Koloskopie empfohlen.

• Einfacher Bluttest für erhöhte Patienten-Akzeptanz bei der Darmkrebs-Früherkennung
• Robuster Test, der sich leicht in die tägliche Labor-Routine integrieren lässt
• Präzise und hoch sensitive Duplex real-time PCR zum Nachweis der Darmtumor-DNA

Der Septin9 Test Epi proColon basiert auf dem spezifischen Nachweis von methylierter DNA der V2-Region des Septin9-Gens (SEPT9) im Blutplasma. Die DNA-Methylierung ist biologischer Prozess, der die Genexpression und die Stabilität der Gene reguliert. Jeder Zelltyp verfügt über einen einzigartigen DNA-Methylierungs Fingerabdruck, der sich in biologischen Prozessen und bei vielen Krankheiten und insbesondere bei Krebserkrankungen verändert ¹. In Darmkrebsgewebe sind die Cytosinreste der V2-Region des Septin9-Gens methyliert, nicht aber in der normalen Darmschleimhaut ². Dieses Darmkrebs-spezifische Methylierungsmuster kann verwendet werden, um die Darmtumor-DNA die von den Tumorzellen ins Blut abgegeben wurde, spezifisch nachzuweisen. Der Nachweis von Darmkrebs-DNA in Blutplasma mit Hilfe des Septin9-Biomarkers (^mSEPT9) wurde bereits in mehreren Fall-Kontroll-Studien mit Darmkrebs-Patienten und gesunden Probanden bestätigt und ist somit ein verlässlicher Indikator für das Vorhandensein von Darmkrebs ^3–5.

Arbeitsablauf von Epi proColon

Der Test besteht aus drei Kits:

1. Epi proColon Plasma DNA Präparations-Kit zur Isolierung, Bisulfit-Konvertierung und Aufreinigung von zellfreier DNA in menschlichem Blutplasma.
2. Epi proColon real-time PCR-Kit zum qualitativen Nachweis von ^mSEPT9 in Bisulfit-konvertierter DNA. Der Test ist eine Duplex-PCR, die die methylierte DNA des Septin9-Gens und ACTB-DNA (beta-Actin) zur internen Kontrolle amplifiziert. Das ^mSEPT9-Testergebnis ist positiv, negativ oder ungültig.
3. Epi proColon Work Flow Kontroll-Kit enthält Positiv-und Negativ-Kontrollproben für die Kontrolle der DNA-Vorbereitung, Bisulfit-Konvertierung, Amplifikation und Detektion bei der Prozessierung der Plasmaproben.

^mSEPT9 Duplex real-time PCR-Analyse

^mSEPT9 Detektion

Abbildung 1: Nachweis von ^mSEPT9 (oben) und der internen Kontrolle ACTB (unten) in EDTA Plasma von Darmkrebs-Patienten und gesunden Probanden, sowie positive und interne Kontrolle: ACTB Detektion negative Epi proColon Work Flow Kontrollen. Die Messungen wurden auf einem Light Cycler^® 480-Instrument durchgeführt.

Leistungsdaten 

Klinische Spezifität und Sensitivität
Die Leistungsfähigkeit des Biomarkers ^mSEPT9 wurde in mehreren unabhängigen Studien mit mehr als 3.000 getesteten Plasmaproben bestätigt. Der Septin9-Test identifizierte ca. 70% der Krebsfälle mit einer Spezifität von ca. 90% in den durchgeführten Trainings-und Teststudien ⁵. Die Leistungsdaten können populationsabhängig variieren.

Robustheit
Die Robustheit des Epi proColon Darmkrebs-Früherkennungstests wurde geprüft, indem die häufigsten Durchführungsfehler getestet wurden, die zu falsch negativen oder falsch positiven Ergebnissen führen können. Es konnte bestätigt werden, dass solche Durchführungsfehler durch die Workflow-Kontrollen zuverlässig angezeigt werden.

Reproduzierbarkeit
Aliquots der Proben wurden wiederholt mit dem Epi proColon DNA Plasma Präparations-Kit präpariert und mit dem Epi proColon real-time PCR-Kit gemessen. Die Studie wurde gemäß der Leitlinien des NCCLS (National Commitee for Laboratory Standards) durchgeführt, um die Reproduzierbarkeit der Testergebnisse zu demonstrieren. Ein vierfacher Plasma-basierter Standard wurde untersucht unter Verwendung von drei Reagenzienchargen, die von drei Mitarbeitern auf drei verschiedenen real-time PCR-Instrumenten gemessen wurden. Die Reproduzierbarkeit der Ergebnisse lag bei 95%.

Bestellinformation

Epi proColon Darmkrebs-Früherkennungstest, für 24 Anwendungen

Bestell-Nr. M5-01-001 Epi proColon Plasma DNA Präparations-Kit
Bestell-Nr. M5-01-002 Epi proColon real-time PCR-Kit
Bestell-Nr. M5-01-003 Epi proColon Work Flow Kontroll-Kit

Kontakt und Vertrieb

Epigenomics AG
Kleine Präsidentenstraße 1
10178 Berlin
Tel.: 030 24345-111
Fax: 030 24345-333
sales@products.epigenomics.com
www.epigenomics.com

CE Kennzeichnung gemäß der Europäischen IVD Direktive 98/79/EC

Referenzen:

1. Esteller, M. Relevance of DNA methylation in the management of cancer. The Lancet Oncology 4, 351–358 (2003)
2. Model, F., et al. Identification and validation of colorectal neoplasia-specific methylation markers for accurate classification of disease. Mol Cancer Res 5, 153–163 (2007)
3. Lofton-Day, C. et al. DNA methylation biomarkers for blood-based colorectal cancer screening. Clinical Chemistry 54:2, 414–423 (2008)
4. Gruetzmann, R. et al. Sensitive Detection of Colorectal Cancer in Peripheral Blood by Septin 9 DNA Methylation Assay. PLoS ONE, Volume 3, Issue 11, e3759 (2008)
5. De Vos, T. et al. Circulating methylated SEPT9 DNA in Plasma is a Biomarker for Colorectal Cancer, Clinical Chemistry, 55:7, 1337–1346 (2009) 

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Broschüre "Epi proColon Darmkrebs-Früherkennungstest" zum Download 
PDF-Datei (400 kB)

Sicherheitsblätter

Sicherheitsblatt Epi proColon Plasma DNA Präparations-Kit
PDF-Datei (988 kB)

Sicherheitsblatt Epi proColon real-time PCR-Kit
PDF-Datei (185 kB)

Sicherheitsblatt Epi proColon Work Flow Kontroll-Kit
PDF-Datei (164 kB)