Bei bis zu 50 % der Patienten mit Verdacht auf Lungenkrebs kann in der klinischen Routine das Vorhandensein eines bösartigen Tumors zum Zeitpunkt der ersten Bronchoskopie nicht durch eine zytologische oder histologische Untersuchung des gewonnenen Probenmaterials bestätigt werden.1,2 Für den Patienten kann dies weitere invasive Untersuchungen und eine Zeitverzögerung bei der Diagnosestellung bedeuten.
Der Epi proLung BL Reflex Assay
Der Epi pro Lung BL Reflex Assay wurde entwickelt, um dem Arzt zusätzliche Informationen bei der diagnostischen Abklärung von Patienten mit Verdacht auf Lungenkrebs bereitzustellen. Der Test soll die bestehende Diagnostik ergänzen und eine zusätzliche Möglichkeit zur Sicherung der Diagnose bieten und somit das Risiko von Verzögerungen bei der Sicherung der Diagnose und der Einleitung der Behandlung minimieren. Bisherige klinische Studien haben gezeigt, dass mSHOX2 ( d. h. die Methylierung des Gens SHOX2 ) in Bronchiallavageproben ein sehr spezifischer Biomarker für Lungenkrebs ist. Das benötigte Untersuchungsmaterial wird routinemäßig bei der Spülung der Lunge im Rahmen einer Bronchoskopie gewonnen. Durch die Ergänzung der diagnostischen Zytologie um diese molekulare Information könnten dem Patienten weitere Untersuchungen erspart werden, Tumore früher erkannt werden.
Abbildung 1: Lungenkrebsdiagnostik unter Einbeziehung der Messung der Methylierung des Gens SHOX2
Der Epi proLung BL Reflex Assay besteht aus drei Kits:
- Epi proLung BL DNA Präparations-Kit für Zellaufschluß, Bisulfit - Konvertierung und Aufreinigung der DNA aus aus Saccomanno-fixierten Bronchiallavageproben.
- Epi proLung BL real-time PCR-Kit zum Nachweis von mSHOX2 in Bisulfit- konvertierter DNA. Der Test basiert auf einer Duplex-PCR, die sowohl die Menge der methylierten DNA des SHOX2- Gens als auch die ACTB DNA ( beta-Aktin ) zur Bestimmung der Gesamt - DNA - Menge amplifiziert. Das mSHOX2- Ergebnis ist bei gültigen Kontrollen entweder positiv oder negativ.
- Epi proLung BL Work Flow Kontroll - Kit enthält Positiv - und Negativ- Kontrollproben für die Überprüfung des gesamten Arbeitsablaufes für Bronchial lavageproben von Zellaufschluß, über Bisulfit - Konvertierung und DNA - Aufreinigung, bis hin zur Amplifikation und Detektion.
Abbildung 2: Arbeitsablauf des Epi pro Lung BL Reflex Assays
Leistungsdaten
Klinische Sensitivität und Spezifität. Die Leistungsfähigkeit des Biomarkers mSHOX2 wurde in einer CE-Validierungsstudie mit Proben von 75 Patienten mit Lungenkrebs und 79 Patienten mit anderen Lungenkrankheiten (u. a. Pneumonie, Bronchitis, Influenza, COPD, Mycobakteriose, Pilzpneumonie, Pneumocystis, Sarkoidose, Sklerodermie) untersucht. Der Epi pro Lung BL Reflex Assay identifizierte 81% der Krebsfälle mit einer Spezifität von 95%.
Robustheit. Der Epi pro Lung BL Reflex Assay basiert auf der Analyse von fixiertem Probenmaterial aus der klinischen Routine, das keiner zusätzlichen Aufbereitung bedarf. Die Robustheit des Epi pro Lung BL Reflex Assays wurde weiterhin durch die Kombination der für den Test benötigten Komponenten in möglichst wenigen Reaktionsgefäßen optimiert. Zusätzlich wurden die wichtigsten Durchführungsfehler, die zu falsch negativen oder falsch positiven Ergebnissen führen können, untersucht. Es konnte bestätigt werden, dass solche Durchführungsfehler durch die Work Flow - Kontrollen zuverlässig angezeigt werden oder durch das Design des Tests vorab verhindert werden.
Reproduzierbarkeit. Aliquots der Proben wurden wiederholt mit dem Epi pro Lung BL Reflex Assay gemessen. Die Studie wurde gemäß der Leitlinien des CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute) durchgeführt, um die Reproduzierbarkeit der Testergebnisse zu demonstrieren. Drei verschiedene Pools von Bronchiallavageproben sowie Mischungen aus DNA mit bekannter relativer Methylierung wurden untersucht. Hierfür wurden drei Reagenzienchargen verwendet und die Proben von drei Mitarbeitern auf drei verschiedenen real - time PCR Instrumenten gemessen. Es konnte gezeigt werden, dass der Test konsistente Ergebnisse liefert.
Bestellinformation
Epi proLung BL Reflex Assay für 24 Anwendungen
Bestell-Nr. M6-01-001 Epi proLung BL DNA Präparations-Kit
Bestell-Nr. M6-01-002 Epi proLung real-time PCR-Kit
Bestell-Nr. M6-01-003 Epi proLung Work Flow Kontroll-Kit
Kontakt und Vertrieb
Epigenomics AG
Kleine Präsidentenstraße 1
10178 Berlin
Tel.: 030 24345-111
Fax: 030 24345-333
sales@products.epigenomics.com
www.epigenomics.com
CE Kennzeichnung gemäß der Europäischen IVD Direktive 98/79/EC
---
Referenzen:
- K. Roth et al, Predictors of diagnostic yield in bronchoscopy: a retrospective cohort study comparing different combinations of sampling techniques, BMC Pulmonary Medicine 2008, 8:2
- G. Schreiber and D. McCrory, Performance Characteristics of Different Modalities for Diagnosis of Suspected Lung Cancer, Summary of Published Evidence, Chest. 2003;123 :115S –128S
---
Broschüre "Epi proLung BL Reflex Assay" zum Download
 PDF-Datei (554 kB)
Sicherheitsblätter
Sicherheitsblatt Epi proLung Plasma DNA Präparations-Kit
PDF-Datei (598 kB)
Sicherheitsblatt Epi proLung real-time PCR-Kit
PDF-Datei (83 kB)
Sicherheitsblatt Epi proLung Work Flow Kontroll-Kit
PDF-Datei (193 kB)
|
